DPPH自由基清除原理 基于DPPH分子具有一个不成对的电子,这一电子使其在517nm波长处具有强烈吸收峰,表现为紫色溶液。当存在自由基清除剂时,DPPH的单电子会被捕获,导致其颜色从紫色变为黄色或无色。通过测量这一颜色变化,可以评估样品清除自由基的能力,即抗氧化活性。
具体步骤如下:
准备DPPH溶液:
DPPH在有机溶剂中稳定存在,通常以乙醇溶液形式使用,呈紫色,并在低温避光条件下储存。
加入待测样品:
将待测样品加入含有DPPH的溶液中。
反应:
样品中的自由基清除剂会与DPPH分子中的不成对电子结合,使其颜色逐渐变浅。
测量吸光度:
在517nm波长处测量溶液的吸光度,吸光度下降程度与自由基清除剂的量成正比。
计算清除率:
通过公式\[清除率(%) = [1 - (A_i - A_j) / A_c] \times 100\%\]计算样品清除DPPH自由基的能力,其中\(A_i\)为初始吸光度,\(A_j\)为反应后的吸光度,\(A_c\)为对照组的吸光度。
DPPH自由基清除实验是一种简单、快速且有效的评估抗氧化剂活性的方法,广泛应用于食品科学、药品研发和生物活性研究等领域。