磷酸盐缓冲液(PBS)是一种常用的生物缓冲液,用于维持溶液的pH值稳定。以下是PBS缓冲液的配方及配制步骤:
配制配方(1L溶液)
氯化钠 (NaCl):8g
氯化钾 (KCl):0.2g
磷酸氢二钠 (Na2HPO4):1.44g
磷酸二氢钾 (KH2PO4):0.24g
去离子水:加至1000mL
配制步骤
1. 在一个大容器中加入800mL去离子水,并确保容器干净无杂质。
2. 分别称量上述化学试剂,加入到水中。
3. 搅拌均匀,确保所有固体物质完全溶解。
4. 使用pH计检测溶液pH值,应调整至7.2至7.4之间。
5. 最后,用去离子水将体积补足至1L,并再次搅拌均匀。
6. 如需要,可通过过滤(如0.22微米滤器)确保溶液无菌。
保存方法
高温高压灭菌后,室温或4℃冰箱保存。
注意事项
根据实验需要,可以调整pH值至不同的水平。
如果用于免疫组化等生物活性实验,可能需要添加抗生素如青霉素和链霉素。
在含有辣根过氧化物酶的试剂中,应避免使用叠氮钠,而改用0.01%柳硫汞。
以上配方和步骤适用于常规的PBS缓冲液制备。如果有特殊要求,例如需要添加其他成分,可以根据具体实验需求进行调整