企业落实安全生产主体责任的主要措施和实践路径如下：
建立健全安全生产责任体系
制定并完善《安全生产责任制》，将责任分解到每个岗位和每位员工，明确主要负责人为安全生产“第一责任人”，各分管领导、部门负责人按照职责分工落实“一岗双责”。
企业主要负责人需与下属各级管理人员、部门、班组签订安全生产责任书，实现责任书的逐级签订，确保责任链条贯通到底。
完善安全生产管理制度
建立符合国家法律法规要求的安全管理规章制度，包括《隐患排查治理制度》《应急管理制度》《岗位操作规程》等，并持续优化管理制度，结合实际工作特点动态调整。
强化制度执行，通过例会、督查等形式确保各项制度不折不扣地执行，严格落实“三违”管控（即违章指挥、违章作业、违反劳动纪律），对违规行为进行及时纠正和处理。
强化安全生产保障投入
确保资金投入按照法律要求，用于隐患治理、设备升级、培训教育、应急物资采购等，建立专项资金保障制度，设立安全生产费用专账，确保资金合理分配。
完善安全设施，配备符合国家标准的安全生产设备设施，确保其有效运行，定期对设备进行检测、维护和保养，杜绝因设备老化、故障导致的安全隐患。
加强隐患排查治理
定期开展安全生产巡查和自查自纠活动，发现安全隐患及时整改，确保安全生产环境的安全和健康。
严格落实第一责任人责任
压紧压实企业法定代表人和实际控制人的第一责任，企业董事长、总经理等法定代表人和实际控制人是安全生产第一责任人，对本单位的安全生产工作全面负责，应亲自推动安全生产制度的建立，经常深入一线检查安全生产工作，监督安全生产制度落实，研究解决安全生产突出问题。
坚持依法生产经营，企业必须牢固树立法治观念，从事生产经营活动应依法取得安全生产相关证照和许可，符合法律法规、国家和地方标准或者行业标准规定的安全生产条件，及时主动获取并严格执行与安全生产相关的法律法规标准。
加强安全管理机构和人员配备
企业应依法依规设置安全生产管理机构或者配备专（兼）职安全生产管理人员，企业主要负责人、分管安全生产负责人、安全总监、安全生产管理人员，应具备与本单位所从事的生产经营活动相适应的安全生产知识和管理能力。
加强安全生产培训和教育
定期组织各级管理人员和员工进行安全生产培训和教育，提高安全生产意识和技能，掌握安全生产法律法规和操作规程。
建立安全生产信息化管理系统
运用现代信息技术手段，建立各级管理人员的工作台账、安全生产巡查记录、隐患整改台账等日常工作信息化管理系统，实时监控安全生产状况。
加强安全事故应急预案的制定和演练
制定完善的安全事故应急预案，进行定期演练和评估，提高安全生产应急处理能力和应对能力。
加强对供应商和合作伙伴的安全生产管理
建立供应商和合作伙伴安全生产管理体系，对其进行安全生产能力评估和监督，确保供应链的安全。
加强与相关监管部门的沟通和合作
积极与相关部门沟通合作，及时了解和执行相关安全生产法律法规和标准，与监管部门建立稳定的沟通机制。
通过以上措施，企业可以全面落实安全生产主体责任，确保安全生产工作的有效开展，防范和控制各类安全事故的发生。