磷酸盐缓冲液(PBS)和磷酸盐吐温缓冲液(PBST)是常用的生物实验缓冲液,用于维持生理pH值并提供离子环境。以下是PBST缓冲液的配方和配制方法:
PBST缓冲液配方
1X浓度(pH 7.4):
NaCl:8.0g
KCl:0.2g
Na2HPO4·2H2O:1.44g
KH2PO4:0.24g
Tween-20:0.1% (体积/体积比例,即1mL Tween-20加入1L PBST中)
去离子水:余量至1L
配制步骤:
1. 将上述成分按照配方比例称量并溶解在去离子水中。
2. 用浓盐酸调节溶液的pH值至7.4。
3. 加入0.1% Tween-20,继续搅拌至均匀混合。
4. 将制备好的PBST缓冲液过滤或离心,去除可能存在的颗粒或杂质。
5. 分装到无菌瓶中,保存于室温或4℃冰箱中备用。
注意事项
缓冲液的pH值可能会因温度、pH计精度等因素略有变化,建议使用pH计进行验证。
Tween-20的加入有助于减少非特异性蛋白结合,提高实验的特异性。
缓冲液应避免反复冻融,以免影响其稳定性。
其他信息
0.01M PBS的配方通常为:NaCl 135 mM,KCl 2.7 mM,KH2PO4 1.5 mM,K2HPO4 8 mM,pH 7.2。
TBST缓冲液是在PBS基础上加入0.1% Tween-20,用于蛋白质印迹等免疫实验,配方与PBST类似。
希望这些信息对您的实验有所帮助。