磷酸盐缓冲盐水溶液(PBS)是一种常用的生物缓冲液,用于维持溶液的pH值稳定。以下是PBS缓冲液的配制方法:
1. 10×PBS母液配制
1. 准备所需材料:称取磷酸二氢钾(KH2PO4)、磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O)、氯化钠(NaCl)、氯化钾(KCl)。
2. 配制10×PBS母液:
磷酸二氢钾(KH2PO4):0.24g
磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O):1.44g
氯化钠(NaCl):8.0g
氯化钾(KCl):0.2g
加去离子水至1000mL
3. 溶解:将上述物质加入去离子水中,搅拌至完全溶解。
4. 调节pH值:使用浓盐酸或氢氧化钠溶液调节pH值至7.4。
5. 灭菌:将配制好的10×PBS母液进行高压蒸汽灭菌(至少20分钟),然后冷却至室温。
2. 稀释10×PBS母液
1. 取100mL 10×PBS母液加入900mL去离子水中进行稀释。
2. 搅拌均匀,即可得到pH值为7.4的PBS缓冲液。
3. 特殊PBS配方(含吐温-20)
1. 准备所需材料:称取磷酸二氢钾(KH2PO4)、磷酸氢二钠(Na2HPO4·2H2O)、氯化钠(NaCl)、氯化钾(KCl)、吐温-20。
2. 配制含0.05%吐温-20的pH7.4的PBS-T缓冲液:
磷酸二氢钾(KH2PO4):0.24g
磷酸氢二钠(Na2HPO4·2H2O):1.44g
氯化钠(NaCl):8.0g
氯化钾(KCl):0.2g
吐温-20:0.5mL
加去离子水至1000mL
3. 溶解:将上述物质加入去离子水中,搅拌至完全溶解。
4. 调节pH值:使用浓盐酸或氢氧化钠溶液调节pH值至7.4。
5. 灭菌:将配制好的PBS-T缓冲液进行高压蒸汽灭菌(至少20分钟),然后冷却至室温。
注意事项
确保所有材料使用去离子水配制,以避免离子污染。
调节pH值时,可以使用pH计进行校准,确保pH值准确。
灭菌后的PBS缓冲液应储存在室温或4℃冰箱中。
以上是PBS缓冲液的配制方法。